Adenovirus Packaging

Adenovirus ist ein lineares und doppelsträngiges DNA-Virus ohne Oberflächenhülle. Es kann sowohl teilende als auch nicht teilende Zellen infizieren. Rekombinantes Adenovirus kann durch Rezeptor-vermittelte Endozytose in Zellen eindringen, während sein Genom nicht in das Genom der Wirtszelle integriert wird. Adenovirus wird häufig in der Erforschung von Herz-Kreislauf-, Leber-, Muskel-, Lungen-, Krebs- und anderen Gebieten eingesetzt. Es hat die Eigenschaften einer Vielzahl von Wirt, einer starken Immunogenität, einer großen Kapazität, keiner Integration in Genom, einer vorübergehenden Expression und so weiter. Zur Gewähr der Sicherheit wird das humane Adenovirus Typ 5 (Ad5) verwendet, das ein replikationsinkompetentes Adenovirus (E1- und E3-Gene wurden entfernt) ist. E1 ist für die Replikation des Adenovirus essentiell. Das Fehlen von E1 verhindert seine Selbstreplikation. Seine Replikation hängt von Verpackungszellen wie 293A-Zellen ab, die eine transkomplementäre Replikation für das Adenovirus bereitstellen. Das vom E3-Gen exprimierte Protein kann dem antiviralen Abwehrsystem des Wirts widerstehen, und die Entfernung der E3-Region kann die Immunantwort des Wirts verringern. Die von Ubigene bereitgestellten Adenoviruspartikeln werden zentrifugiert und durch Gradienten-Ultrazentrifugation filtriert, und der Titer wird durch Chitin-Immunoassay bestimmt. Der Titer des Adenovirus liegt im Bereich von 10^10 ~ 10^12 pfu / ml.

Workflow und Validierung: